SAMANTEKT OG SKÝRINGAR PRÓFINN
Visceral leishmaniasis, eða Kala-azar, er dreifð sýking af völdum nokkurra undirtegunda L. donovani.Alþjóðaheilbrigðismálastofnunin (WHO) áætlar að sjúkdómurinn hafi áhrif á um það bil 12 milljónir manna í 88 löndum.Það smitast í menn með bitum af Phlebotomus sandflugum, sem fá sýkingu af því að fæða sýkt dýr.Þó það sé sjúkdómur sem finnst í fátækum löndum, í Suður-Evrópu, hefur hann orðið leiðandi tækifærissýking hjá alnæmissjúklingum.Auðkenning á L. donovani lífveru úr blóði, beinmerg, lifur, eitlum eða milta veitir ákveðna leið til greiningar.Sermisgreining á and-L.reynst donovani IgM vera frábært merki fyrir bráða leishmaniasis í innyflum.Próf sem notuð eru á heilsugæslustöð eru innifalin ELISA, flúrljómandi mótefni eða bein kekkjupróf 4-5.Nýlega hefur nýting á L. donovani sértæku próteini í prófinu bætt næmni og sérhæfni verulega.
Leishmania IgG/IgM Combo Rapid Test er sermipróf sem byggir á raðbrigðum próteinum, sem greinir IgG og IgM mótefni gegn L. Donovani samtímis.Prófið gefur áreiðanlega niðurstöðu innan 15 mínútna án nokkurra tækja.
MEGINREGLA
Leishmania IgG/IgM hraðprófið er hliðarflæðisskiljun ónæmisgreiningar.Prófunarhylkið samanstendur af: 1) vínrauðum lituðum samtengdum púða sem inniheldur raðbrigða L. donovani mótefnavaka samtengda með kolloid gulli (Leishmania conjugates) og kanínu IgG-gull samtengingum, 2) nítrósellulósa himnustrimla sem inniheldur tvö prófunarbönd (T1 og T2 bönd) og stjórnband (C band).T1 bandið er forhúðað með einstofna and-manna IgM til að greina and-L.donovani IgM, T2 bandið er forhúðað með hvarfefnum til að greina and-L.donovani IgG, og C bandið er forhúðað með geita-anti kanínu IgG.
Þegar nægilegu rúmmáli af prófunarsýni er dreift í sýnisholuna á snældunni, flytur sýnið með háræðaáhrifum yfir hylkin.L. donovani IgM ef það er til staðar í sýninu mun bindast Leishmania samtengingunum.Ónæmisfléttan er síðan tekin á himnuna af forhúðuðu IgM mótefninu gegn mönnum, sem myndar vínrauðat T1 band, sem gefur til kynna jákvæða niðurstöðu L. donovani IgM.L. donovani IgG ef það er til staðar í sýninu mun bindast Leishmania samtengingunum.Ónæmisfléttan er síðan tekin af forhúðuðu hvarfefnum á himnunni og myndar vínrauða litaða T2 band, sem gefur til kynna L. donovani IgG jákvæða niðurstöðu.
Skortur á T-böndum (T1 og T2) bendir til neikvæðrar niðurstöðu.Prófið inniheldur innra eftirlit (C band) sem ætti að sýna vínrauða litaða band af ónæmisfléttu geita gegn kanínu IgG/kanínu IgG-gull samtengdu óháð litaþróun á einhverju T bandinu.Annars er prófunarniðurstaðan ógild og sýnishornið verður að prófa aftur með öðru tæki.
